Генетичния тест на Лаборатория “Reunis”- Люксембург, въвежда възможността за неинвазивно генетично изследване на ДАО активността. Това е тест, който извършва високочуствителна генотипизация на най-подходящите генетични варианти на AOC1 гена (DAO) на базата на проба от ДНК екстракция.
Предимства и характеристики на генетичното тестване на ДАО активността, с HISTAMINgen:
- Удобен: записва се час за взимане на проба в лабораторията на “Detox Center”
- Лесен: необходима е проба от слюнка или серум, безболезнено и неинвазивно
- Резултати до 14 дни
- Уникален: резултат валиден за цял живот
- Иновативен: начало на технологиите
- Семеен: резултатът може да показва вероятността от съществуването на генни варианти, свързани с дефицита на ДАО в семейството
HISTAMINgen анализира генетичната предразположеност към хистаминова непоносимост.
В комбинация с измерването на активността на разграждащия хистамина ензим диаминоксидаза (DAO) и оценката на нивата на хистамин, резултатите позволяват диференциране между първична и вторична непоносимост към хистамин.
Въведение
Дефицитът на ДАО се характеризира с дисбаланс между количеството на приетия с храната хистамин и капацитета за неговото разграждане. Диамин оксидазата (DAO/ABP1, хистаминаза) е един от двата ензима, отговорни за разграждането на хистамина. По-специално, ДАО е отговорен за премахването на извънклетъчния хистамин след освобождаването на медиаторите (1). Нарушения катаболизъм на хистамин води до натрупването му до високи нива, причинявайки множество разтройства, като стомашно-чревни симптоми, главоболия, алергични ринити, атопична кожа, хрипове, астма тип и рядко фибромиалгия, сърдечно-съдови симптоми, копривна треска, синдром на дефицит на вниманието и хиперактивност (ADHD)(2).
Прилагане на теста
Приблизително 12% от населението страда от дефицит на ДАО, като е по-разпространено при жените, отколкото при мъжете (3). Дефицитът на ДАО активността е свързан с по-нисък капацитет на разграждане на хистамина погълнат с храната.
Едно от най-признатите последици от метаболитното разтройство е мигрената: въпреки нейната мултифакторна етиология, очевидно дефицитът на ДАО се свързва с появата на мигрена (4-5). Той е свързан също и с генетичния вариант p.T16M към повишен риск от свръхчуствителност към НСПВС(нестероидни противовъзпалителни средства), предложен като биомаркер за клиничен отговор.
Описание на методологията
ДНК-то от пробата се получава чрез автоматично извличане, по-късно се извършва реакция на амплификация чрез полимеразна верижна реакция (PCR) мултиплекс на региони от интерес на АОС1 гена чрез използване на специфични праймери. Анализът на генните варианти се извършва с помоща на SNPE Multiplex (Single Nucleotide First Extension) и последващ анализ на фрагменти.
Генни варианти, включени в теста
Серумните нива на ДАО експресията представляват големи междуиндивидуални вариации. Генът, който кодира протеина DAO/ABP1 е гена AOC1, за който са описани варианти от тип SNP (варианти на единични нуклеотиди), някои от които са свързани с намалени нива на активност на ДАО (7-8). В този тест се анализират 3 алелни варианта на AOC1.
*Класификация на вариантите според препоръките на Американския колеж по медицинска генетика и геномика (10) и според номенклатурата на HGVS (11).
Наличието или отсъствието на мутация не изключва възможността от още една или други в региони, които не са анализирали гена при пациента, или не е открит чрез използваната техника, поради което не са в състояние да изключат възможността от заболяване.
Използвани база-данни:
- OMIM – Онлайн Менделско наследство у човека
- dbSNP – база данни за единични нуклеотидни полиморфизми (12)
Условия на теста
- Проба от букална лигавица с тампон, и попълване на формуляр за изследването
- Взетата проба се транспортира лесно в стабилна среда.
- Резултати до 7-14 дни
- Получаване на отчета за резултатите в медицинския центърДоклад за резултатите
Някои комбинации от анализираните варианти са свързани с генетичен дефицит на ДАО активност. В отчета с резултатите са посочени вариантите, открити при пациента, както и фенотипната интерпретация на намалената активност на ДАО въз основа на получените резултати.
Контрол на качество
Лаборатория REUNIS e лаборатория, сертифицирана от EN-ISO 15189:2012, която извършва генетичен анализ чрез процедури и валидирани протоколи и се препоръчва от Европейската мрежа за качество на молекулярната генетика (EMQN). Анализите са валидирани в съответствие с международните указания (9) и отговарят на всички технически и методологически изисквания, изброени в стандарта за акредитация DIN-EN-ISO 15189:2006, и редовно участва във външен контрол на качеството.
https://portail-qualite.public.lu/fr/accreditation-notification/organismes-accredites/laboratoires/laboratoires-reunis.html
Референции:
1. García-Martín et al. Histamine pharmacogenomics. Pharmacogenomics 2009; 10(5):867-883.
2. Maintz et al. Histamine and histamine intolerance. Am J Clin Nutr 2007; 85:1185-1196.
3. Jarisch et al. Histamin-Intoleranz. Histamin und Seekrankheit, 2 edn. Stuttgart, Germany: Georg Thieme Verlag KG, 2004.
4. Izquierdo-Casas et al. Low serum diamine oxidase (DAO) activity levels in patients with migraine. J Physiol Biochem 2018;74(1):93-99.
5. García-Martín et al. Diamine oxidase rs10156191 and rs2052129 variants are associated with the risk for migraine. Headache 2015;55(2):276-86.
6. Agúndez et al. The Diamine Oxidase gene is associated with hypersensitivity response to non-steroidal anti-inflammatory drugs. PLOS 2012; 7(11):e47571.
7. Ayuso et al. Genetic variability of human diamine oxidase: occurrence of three nonsynonymous polymorphisms and study of their effect on serum enzyme activity. Pharmacogenet Genomics 2007; 17(9):687-93.
8. Maintz et al. Association of single nucleotide polymorphisms in the diamine oxidase gene with diamine oxidase serum activities. Allergy 2001; 66:893-902.
9. Mattocks et al. A standardized framework for the validation and verification of clinical molecular genetic tests. Eur J Hum Genet. 2010 Dec;18(12):1276-88. doi: 10.1038/ejhg.2010.101.
10. Richards et al. (2015). Standards and guidelines for the interpretation of sequence variants: a joint consensus recommendation of the American College of Medical Genetics and Genomics and the Association for Molecular Pathology. Genet Med 17:405–24.
11. Den Dunnen et al. (2016). HGVS recommendations for the description of sequence variants: 2016 update. Hum.Mutat. 25: 37: 564-569.
12. Sherry et al. (2001). dbSNP: the NCBI database of genetic variation. Nucleic Acids Res 29:308–11.
HISTAMINgen: диагностичен тест ин витро за измерване нивата на активност на ензима Диамин оксидаза (DAO) в плазмата
Резултатите от тях определят намалена ензимна активност на DAO, когато стойностите на HDU/ml (единици разграден хистамин / милилитър кръв) са между 80-40 HDU/ml или много ниска активност, когато са под 40 HDU / ml.